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細(xì)胞種屬鑒別檢測(cè)
所有技術(shù)服務(wù)

細(xì)胞種屬鑒別檢測(cè)

生產(chǎn)細(xì)胞培養(yǎng)常有著相近的營(yíng)養(yǎng)條件與環(huán)境因素,在傳代的培養(yǎng)過(guò)程中很容易發(fā)生細(xì)胞間交叉污染。法規(guī)要求了對(duì)細(xì)胞庫(kù)的種屬鑒定,主要目的在于:

① 確認(rèn)細(xì)胞來(lái)源

② 防止交叉污染

③ 識(shí)別細(xì)胞變異

④ 幫助研究細(xì)胞進(jìn)化和分化

總的來(lái)說(shuō),細(xì)胞種屬鑒別檢測(cè)在生物制品中的目的是確定所使用的細(xì)胞種屬,從而確保產(chǎn)品的質(zhì)量、安全性和合規(guī)性。


基于此,我們利用多重PCR開發(fā)出用于10 種常見細(xì)胞的種屬鑒別(牛/豬/犬/小鼠/大鼠/中國(guó)倉(cāng)鼠/非洲綠猴/恒河猴/貓/人)和種屬間細(xì)胞交叉污染的檢測(cè)試劑盒,也提供多種屬近百種細(xì)胞的動(dòng)物細(xì)胞DNA條形碼試劑盒。另外,也可以選擇NGS技術(shù)平臺(tái)能一次性得到最全面的細(xì)胞庫(kù)信息。

 



細(xì)胞種屬鑒別檢測(cè)平臺(tái)

?  多重PCR:

細(xì)胞種屬鑒別檢測(cè)采用多重PCR檢測(cè)技術(shù),搭配我們自主研發(fā)生產(chǎn)的檢測(cè)試劑盒,原理是利用常用物種的細(xì)胞線粒體上3 個(gè)相對(duì)保守的基因,設(shè)計(jì)出可同時(shí)檢測(cè)10 種常見細(xì)胞的種屬鑒別,靈敏度可達(dá)2 個(gè)細(xì)胞/反應(yīng),交叉污染檢測(cè)限至少達(dá)到1/1000 細(xì)胞污染的水平,擴(kuò)增后搭配瓊脂糖凝膠電泳完成判斷,相較于同工酶法,檢測(cè)速度更快、靈敏度更高、試劑采購(gòu)更容易,也比STR圖譜分析法所鑒別的種屬范圍更廣。

 

?  DNA條形碼: 

通過(guò)對(duì)物種特定DNA序列進(jìn)行掃描和比較來(lái)鑒定不同細(xì)胞的生物物種的技術(shù)。

具體操作步驟包括:

① 選擇合適的DNA條形碼區(qū)域(COI)

② 前處理采用DNA免提取法

③ 序列分析

④ 數(shù)據(jù)解讀

此方法受到測(cè)序分辨率的限制,對(duì)細(xì)胞種屬間交叉污染檢測(cè)靈敏度較低,因此建議結(jié)合湖州申科多重PCR與NGS平臺(tái),作進(jìn)一步研究。

 

?  NGS (二代測(cè)序):

通過(guò)NGS技術(shù),對(duì)不同物種細(xì)胞DNA序列的高通量測(cè)序,利用比對(duì)算法將其與數(shù)據(jù)庫(kù)中已知物種DNA序列比對(duì),從而確定待測(cè)樣本中可能存在的細(xì)胞種屬。

此外,還可以進(jìn)行基于組裝和聚類的無(wú)參考基因組分析,對(duì)未知細(xì)胞種屬進(jìn)行鑒定分類。

NGS可以一次性獲取下面訊息:

① 物種鑒定

② 種屬來(lái)源

③ 染色體大結(jié)構(gòu)變化

④ 遺傳漂變

⑤ 外源因子污染

⑥ 種間污染

⑦ 種內(nèi)污染

 



?? 樣品適用性驗(yàn)證服務(wù)

針對(duì)樣品進(jìn)行適用性驗(yàn)證,搭配試劑盒全面性能驗(yàn)證報(bào)告,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性與可信度。

?  精密度(重復(fù)性、中間精密度)驗(yàn)證

?  樣品回收率(準(zhǔn)確性)驗(yàn)證

 

?? 樣品檢測(cè)服務(wù)

利用多重PCR、DNA條形碼和NGS等方法對(duì)客戶提供的樣品進(jìn)行細(xì)胞種屬鑒別,出具相應(yīng)的檢測(cè)報(bào)告。


參考資料:

所有技術(shù)服務(wù)

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